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垂盆草颗粒在寻常型银屑病中的疗效及其对调节性 T 细胞的功能及
【摘要】目的：探讨垂盆草颗粒在寻常型银屑病中的疗效及其对调节性 T 细胞的功能及 STAT3通路的调控作用。方法：选择2014年1月至2016年1月于我院就诊的寻常型银屑病患者56例，采用随机数字表法将患者随机分为观察组和对照组，每组28例。对照组给予雷公藤多苷片联合紫外线（NB-UVB）照射皮损部位。观察组在对照组治疗基础上联合垂盆草颗粒口服。两组疗程均为2个月。评定比较两组临床疗效、生活质量评分、治疗前后T淋巴细胞功能、TNF-α、IL-17、IL-22及STAT3和IL-17A mRNA的表达水平及不良反应情况。结果：治疗后，两组患者的PASI评分显著降低，与治疗前比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后显著低于对照组治疗后水平（P＜0.05）。观察组的临床有效率为96.4%，显著高于对照组的78.6%（P＜0.05）。治疗后，两组的各项HHI评分显著高于，DLQI评分显著低于治疗前（P＜0.05），且观察组各项评分改善程度优于对照组（P＜0.05）。治疗后，两组患者CD3+、CD4+及CD4+/CD8+的比例显著高于，CD8+水平显著低于治疗前（P＜0.05）。且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组（P＜0.05）且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。治疗后，两组患者TNF-α、IL-17及IL-22水平均显著低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组（P＜0.05）。经治疗后，观察组患者外周血中STAT3和IL-17A mRNA的△CT值显著升高，与治疗前相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。经相关性分析显示，患者外周血中STAT3及IL-17A mRNA的△CT值与PASI评分之间呈负相关（r=0.516，P<0.05；r=0.613，P<0.05)。结论：垂盆草颗粒联合西医常规治疗寻常型银屑病患者疗效确切，疗效优于单纯西医治疗，可显著减小皮损面积及严重程度，减轻患者临床症状，提高患者的生活质量。
【关键词】垂盆草颗粒；雷公藤多苷；银屑病；疗效
Therapeutic effect of sarmentol granules on psoriasis vulgaris and its regulation of regulatory T cells and STAT3 pathway
【Abstract】 Objective: To investigate the curative effect of sapogenin granules on psoriasis vulgaris and its regulation of regulatory T cells and STAT3 pathway. Methods: 56 patients with psoriasis vulgaris treated in our hospital from January 2014 to December 2015 were randomly divided into observation group and control group, 28 cases in each group. The patients were randomly divided into observation group and control group. The control group was given triptolide and ultraviolet (NB-UVB) irradiation lesion. The observation group was treated by sapogenes granules oral based on treatment in the control group. Two groups were treated for2 months. The levels of T lymphocyte function, TNF-α, IL-17, IL-22, STAT3 and IL-17A mRNA and adverse effects were compared between the two groups before and after treatment. Results: After treatment, the PASI score of the two groups was significantly lower than that before treatment (P<0.05). And the observation group was significantly lower than the control group after treatment (P<0.05). The clinical effective rate was 96.4% in the observation group, which was significantly higher than that in the control group (P＜0.05). After treatment, the scores of HHI in the two groups were significantly higher than those in the control group (P<0.05), and the score of the observation group was better than that of the control group (P<0.05). After treatment, the ratio of CD3+, CD4+ and CD4+/CD8+ in the two groups was significantly higher than that before treatment (P<0.05). The improvement of the indexes in the observation group was significantly better than that in the control group (P<0.05). The improvement of the indexes in the observation group was significantly better than that in the control group (P<0.05). After treatment, the levels of TNF-α, IL-17 and IL-22 in the two groups were significantly lower than those before treatment (P<0.05), and the improvement of the indexes in the observation group was significantly better than that in the control group (P<0.05). After treatment, the CT values of STAT3 and IL-17A mRNA in the peripheral blood of the observation group were significantly higher than those before treatment (P<0.05) and there was a negative correlation between the △CT value of STAT3 and IL-17A mRNA. Conclusion: The treatment of psoriasis vulgaris is better than that of western medicine alone, which can significantly reduce the area and severity of lesion, reduce the clinical symptoms and improve the quality of life of patients.
【Key words】 sagittal grass particles; Tripterygium wilfordii polyglycoside; psoriasis; efficacy
银屑病是一种临床常见的慢性炎症性皮肤病，主要由皮肤出现反复发作的红斑或银白色鳞屑为主要临床特征，在我国的发病率约为5%，呈不断增高的趋势，由于寻常型银屑病反复发作、迁延难愈，临床表现的严重脱屑、瘙痒难忍的皮损症状虽无法危及患者生命，但严重影响了患者的生活质量，使患者出现悲观、焦虑及抑郁的情绪[1]。因此，寻找治疗银屑病的有效药物具有重要临床意义。目前，银屑病的发病机制尚不十分清晰。多项研究表明[2-3]，其发病与遗传、免疫等因素有关，由T淋巴细胞介导的免疫炎性损伤可能在银屑病的发病中发挥重要作用。目前，临床综合疗法治疗银屑病的疗效不理想，且存在多种副作用，而传统中医学在治疗银屑病方面显示出了良好的前景[4]。本研究观察了垂盆草颗粒治疗寻常型银屑病患者的临床疗效，并分析其对调节性T 细胞及STAT3通路的调控作用，现报道如下。
1. 资料和方法
1.1 一般资料 选择2014年1月至2016年1月期间于我院就诊的寻常型银屑病患者56例，其中，男33例，女23例；年龄20～53岁，平均年龄（40.7±14.9）岁；病程2个月～19年，平均病程（6.8±9.5）岁；采用用银屑病面积和严重程度指数（PASI）进行病情评估，PASI评分1.7～50.3分，平均（19.7±8.3）分。纳入标准：①所有患者均符合ICD-10寻常型银屑病的诊断标准，且采用《中药新药临床研究指导原则》中银屑病以湿热蕴结证的诊断标准；② PASI评分均在10分以上；③年龄≥18岁；④进入本研究前均知情同意，签署知情同意书；⑤入组前1个月均未使用抗银屑病药物及糖皮质激素制剂进行治疗；⑥本研究已本医院医学伦理委员会批准开展。排除标准：①合并其他皮肤病及自身免疫性疾病患者；②合并心肝肾功能不全、神经系统疾病、内分泌系统及恶性肿瘤疾病者；③孕期、哺乳期妇女；④合并严重感染患者；④存在精神疾患无法配合治疗患者。采用随机数字表法将56例患者随机分为观察组和对照组，每组各28例。两组的性别、年龄、病程及PASI评分比较差异无统计学意义，具有可比性（P＞0.05）。
1.2 治疗方法 所有患者进入本研究后均开始给予给予雷公藤多苷片口服，每次20mg，每日3次，同时给予311 nm窄谱中波紫外线（NB-UVB）照射皮损部位，照射时首先测定最小红斑量，依据最小红斑量进行初始剂量的确定，范围在0.1～0.4 J/cm2，每3日照射1次，并根据红斑变化调整剂量，至少进行20次照射治疗。观察组在对照组治疗基础上联合垂盆草颗粒口服，每次1袋，每日3次。两组疗程均为2个月。2个月后评价疗效。
1.3 观察指标
1.3.1两组临床疗效比较 观察并记录患者治疗前后皮损面积及红斑、鳞屑的严重程度及浸润、瘙痒程度及的变化情况，参照文献标准进行PASI的评价，以红斑评分、 鳞屑评分及浸润评分之和与面积评分的乘积计算对PASI评分，同时，根据PASI评分进行临床疗效评估，疗效标准：若经治疗后PASI下降≥90%视为治愈；若经治疗后PASI下降≥60%视为显效；若经治疗后PASI下降≥25%视为好转；若经治疗后PASI＜25%视为无效。以治愈+显效例数计算临床总有效率。
1.3.2 两组患者生活质量评分比较 分别于治疗前后，由经过专业培训的调查研究人员进行问卷调查，问卷采用匿名填写并独立完成，所有患者均进行了有效的问卷调查。采用Herth希望量表（HHI）进行调查，主要了解患者对银屑病的希望水平和心理状态。 量表包括三个维度12个条目，即：对现实和未来的积极态度、采取积极的行动、与他人保持亲密的关系，采用likert 4级评分法进行评价，得分范围为12～48分，得分水平越高，表明希望水平越高。同时，采用皮肤病生活质量指数（DLQI）进行患者生活质量的评价，问卷主要包括10个项目，即：生理、心理、日常 活动、穿衣、社交娱乐、运动、工作学习、家庭、性生活及治疗，从症状和感受、日常活动、休闲、工作或学校的表现、个人关系和治疗6个不同的层面来评估患者与健康相关的生活质量。得分范围0分（完全不受影响）～30分（非常受影响），DLQI评分水平越低，表明患者生活质量越高。
1.3.3 两组患者治疗前后T淋巴细胞功能比较 分别于治疗前后抽取两组患者清晨空腹肘静脉血2 ml，肝素抗凝后，置于流式检测管中，每管加入相应抗体各5μl，同时，在空白对照管中加入5μl的流式抗体，4℃条件下孵育30min，加入相应标记物，流式细胞仪检测各组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+的比例及Th辅助细胞Th1和Th2细胞的比例。
1.3.3 两组患者炎性细胞因子水平比较 分别于治疗前后采集空腹肘静脉血2ml，3000r/min离心15min后，留取血清，采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测两组患者血清TNF-α、IL-17和IL-22的水平。
1.3.4 两组患者STAT3和IL-17A mRNA的表达水平比较 分别于治疗前后抽取外周肘静脉血2 mL，乙二胺四乙酸抗凝，-80℃保存备用。采用RNA提取试剂盒提取每份样本的全血总RNA，核酸蛋白测定仪检测A 260/A280比值以及总RNA浓度，若总RNA浓度在1.8～2.2则认为RNA纯度较好。之后按照反转录试剂盒说明书进行cDNA的反转录，反转录产物直接进行PCR扩增。选择β-actin为内参，STAT3：上游引物 5’-CACATGCCACTTTGGTGTTTCA-3’，下游引物5’-GGGCAATCTCCATTGGCTTC -3’。IL-17A：5’-CAGACTACCTCAACCGTTCCA-3’，5’-ACAATCGAGGCC ACGC AGGTGCAGC-3’。 目的基因引物和内参基因引物进行扩增同时在 60-95℃进行溶解曲线分析。采用2-ΔΔCt法进行数据的相对定量分析。最后对STAT3和IL-17A mRNA的表达与PASI进行相关性分析。
1.3.5 两组患者不良反应情况比较 观察并比较两组患者治疗过程中的不良反应发生情况。
1.4 统计学方法
采用SPSS 13.0统计软件包进行数据分析。计量资料采用均数±标准差(`x ±ｓ)表示，两组间均数比较采用两独立样本t检验，同组干预前后均数比较采用配对t检验。率的比较采用χ2检验。相关分析采用Spearman或Pearson相关分析。等级资料比较采用秩和检验。P＜0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 两组临床疗效比较
两组患者治疗前PASI评分比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组患者的PASI评分显著降低，与治疗前比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后显著低于对照组治疗后，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1.
经2个月的治疗后，观察组的的临床有效率为96.4%，显著高于对照组的78.6%，差异有统计学意义（χ2=4.082，P=0.043）。见表2.
表1 两组PASI评分比较 (`x ±ｓ，分)
表2 两组临床疗效比较 例（%）
2.2 两组患者HHI及DLQI评分比较
两组患者治疗前各项HHI及DLQI评分比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组的各项HHI评分显著高于，DLQI评分显著低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05），且观察组各项评分改善程度优于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3.
表3 两组患者HHI及DLQI评分比较(`x ±ｓ，分)
注：与治疗前比较，△P＜0.05；与对照组比较，▲P＜0.05。
2.3两组患者治疗前后T淋巴细胞功能比较
两组患者治疗前CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+的比例比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组患者CD3+、CD4+及CD4+/CD8+的比例显著高于治疗前， CD8+水平显著低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表4.
表3 两组患儿治疗前后淋巴细胞亚群比较（
±s，n=60）
注：与治疗前比较，△P＜0.05；与对照组比较，▲P＜0.05。
2.4 两组患者炎性细胞因子水平比较
两组患者治疗前TNF-α、IL-17及IL-22水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组患者TNF-α、IL-17及IL-22水平均显著低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表5.
表5 两组细胞因子的比较 (`x ±ｓ，pg/ml)
注：与治疗前比较，△P＜0.05；与对照组比较，▲P＜0.05。
2.5 STAT3及IL-17A mRNA的表达
治疗前，各组银屑病患者外周血中STAT3，IL-17A mRNA的△CT值显著小于正常组，说明STAT3及IL-17A mRNA的表达量均增高。经治疗后，观察组患者外周血中STAT3和IL-17A mRNA的△CT值显著升高，与治疗前相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。说明患者经治疗后STAT3及IL-17 mRNA的表达量明显降低。而对照组STAT3和IL-17A mRNA的△CT值较治疗前虽有所下降，但差异无统计学意义（P>0.05）。见表6.
经相关性分析显示，患者外周血中STAT3及IL-17A mRNA的△CT值与PASI评分之间呈负相关（r=0.516，P<0.05；r=0.613，P<0.05)，说明STAT3及IL-17A mRNA的表达与PASI呈正相关性。
表6 两组STAT3及IL-17A mRNA的表达水平比较 (`x ±ｓ)
Tab 6 The comparison of STAT3 and IL-17A mRNA expression between the two groups (`x ±ｓ)
注：与治疗前比较，△P＜0.05；与对照组比较，▲P＜0.05。
2.6 两组患者不良反应比较 两组治疗过程中检测血常规、尿常规及肝肾功能、心电图均在正常范围内。治疗过程中，未见严重不良反应发生。
3. 讨论
目前，银屑病的发病机制尚不明确。大多数学者认为可能与遗传、感染、免疫、内分泌等多种因素密切相关。大部分学者认为其与T细胞介导的免疫反应密切相关，近年临床研究显示[5-6]，银屑病患者可溶性白细胞介素-2受体水平显著增高，同时伴有CD3+、CD4+细胞百分率及CD4+/CD8+的比例的降低，提示我们银屑病的患者存在细胞免疫功能下降的情况。同时，另有研究显示[7]，银屑病患者血清中TNF-α、IL-8及CD8+水平均显著增高，说明T淋巴细胞亚群参与了银屑病病情的发生发展，在其发病过程中存在着效应性T淋巴细胞的异常活化，而其相关炎性细胞因子TNF-α能够促进其炎性损伤过程，同时，还可诱导角质形成细胞分泌细胞间黏附分子1，促进淋巴细胞和中性粒细胞的粘附与聚集。另外，STAT3信号通路可能在银屑病的发病过程中发挥重要作用。研究表明[8]，银屑病患者皮损处可检测到STAT3的活化表达，若给予将K5.STAT3c转基因小鼠模型中的STAT3进行持续激活，小鼠可出现与的银屑病类似的皮损及组织病理学改变，提示STAT3通路激活后影响了患者的自身免疫稳态，导致银屑病的发生。STAT3可通过促进原始T细胞向CD4+效应T细胞（Th17 细胞）的转化，上调IL-17, IL-21, IL-22等因子的表达水平，导致炎症反应损伤的发生与发展。在多项临床研究中显示，银屑病患者皮损中IL-17和IL-22呈高表达状态。本研究结果显示，两组银屑病患者治疗前CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+的比例存在着异常表达，同时，STAT3及IL-17 mRNA的表达量均显著高于正常组，且STAT3及IL-17A mRNA的△CT值与PASI评分之间呈负相关，进一步证实了银屑病患者体内确实存在T淋巴细胞功能的紊乱，STAT3可以通过促进原始T细胞向Th17细胞分化，促进IL-17分泌而参与银屑病炎性损伤过程。
以往银屑病的治疗多采用雷公藤、甲氨喋呤等免疫抑制剂[9]，虽有一定的疗效，但副作用大，部分患者无法耐受且停药易复发，因此，寻找疗效确切、安全性好的治疗药物成为研究的热点。
寻常型银屑病可归属于传统中医学中的“白疕风”、“松皮癣”等病， 患者往往因素体热盛，后在饮食劳倦、情志内伤、外感邪气等因素作用下，风湿寒邪侵袭肺、胃，淤积于肌肤，导致气血运行失和，邪郁化火，热盛生风，肌肤失养脱屑，因此，本病在多以血热为主，可夹杂风、寒、湿邪致病，治法多以清热凉血解毒、润燥止痒之剂为主。垂盆草为景天科植物垂盆草的干燥全草，甘、淡，凉。有清热利湿；解毒消肿；止血养血之功效。临床被广泛应用于湿热黄疸；淋病；泻痢；肺痈；肠痈；疮疖肿毒；蛇虫咬伤；水火烫伤；咽喉肿痛；口腔溃疡及湿疹；带状疱疹。垂盆草颗粒是采用垂盆草全草，经现代工艺制成的颗粒制剂，主要大应用于急慢性肝炎湿热瘀结证[10]。但其在银屑病中的应用尚未见报道。
本研究结果显示，治疗后，两组患者的PASI评分显著降低，与治疗前比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后显著低于对照组治疗后（P＜0.05）。观察组的的临床有效率为96.4%，显著高于对照组的78.6%（χ2=4.082，P=0.043），治疗后，两组的各项HHI评分显著高于，DLQI评分显著低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05），且观察组各项评分改善程度优于对照组（P＜0.05）。提示联合使用垂盆草颗粒可提高湿热蕴结证银屑病的临床疗效。
另外，结果还显示，两治疗后，两组患者CD3+、CD4+及CD4+/CD8+的比例显著高于， CD8+水平显著低于治疗前（P＜0.05）。两组患者TNF-α、IL-17及IL-22水平均显著低于治疗前（P＜0.05）。且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。观察组患者外周血中STAT3和IL-17A mRNA的△CT值显著高于治疗前。说明经治疗后银屑病患者紊乱的T淋巴细胞功能得到了有效平衡，STAT3的活化得到了有效抑制，从而有效抑制了TNF-α、IL-17及IL-22等炎性因子的过度表达，减轻了皮损的炎性损伤，而观察组各项指标改善程度更加明显，说明联合垂盆草颗粒能更显著的抑制Th17细胞所导致的组织炎症损伤，改善机体免疫功能，疗效优于单纯西医治疗。
综上，垂盆草颗粒联合西医常规治疗寻常型银屑病患者疗效确切，疗效优于单纯西医治疗，可显著减小皮损面积及严重程度，减轻患者临床症状，提高患者的生活质量，其疗效机制可能与下调STAT3信号通路的表达，TNF-α、IL-17及IL-22等炎性因子的过度表达，改善了免疫功能，减轻了Th17细胞诱导的组织炎症损伤有关。
参考文献
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[3]唐利利,范星,杨森等.人类白细胞抗原与银屑病相关性研究进展[J].国际皮肤性病学杂志,2016,42(3):171-174.
[4]王丽新,段行武.银屑病中医体质研究述评[J].中医杂志,2015,56(23):2060-2063.
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[7]修志民,刘杰,何勇等.窄谱中波紫外线对寻常型斑块状银屑病患者血清肿瘤坏死因子-α、白介素-8水平的影响[J].中国实验诊断学,2008,12(10):1279-1280.
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[9]Driessen RJ,Boezeman JB,van-de-Kerkhof PC et al.Three-year registry data on biological treatment for psoriasis: the influence of patient characteristics on treatment outcome.[J].British Journal of Dermatology,2009,160(3):670-675.
[10]史陈波,叶万君.垂盆草颗粒联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎40例疗效观察[J].浙江中医杂志,2015,50(4):266.
【关键词】垂盆草颗粒；雷公藤多苷；银屑病；疗效
Therapeutic effect of sarmentol granules on psoriasis vulgaris and its regulation of regulatory T cells and STAT3 pathway
【Abstract】 Objective: To investigate the curative effect of sapogenin granules on psoriasis vulgaris and its regulation of regulatory T cells and STAT3 pathway. Methods: 56 patients with psoriasis vulgaris treated in our hospital from January 2014 to December 2015 were randomly divided into observation group and control group, 28 cases in each group. The patients were randomly divided into observation group and control group. The control group was given triptolide and ultraviolet (NB-UVB) irradiation lesion. The observation group was treated by sapogenes granules oral based on treatment in the control group. Two groups were treated for2 months. The levels of T lymphocyte function, TNF-α, IL-17, IL-22, STAT3 and IL-17A mRNA and adverse effects were compared between the two groups before and after treatment. Results: After treatment, the PASI score of the two groups was significantly lower than that before treatment (P<0.05). And the observation group was significantly lower than the control group after treatment (P<0.05). The clinical effective rate was 96.4% in the observation group, which was significantly higher than that in the control group (P＜0.05). After treatment, the scores of HHI in the two groups were significantly higher than those in the control group (P<0.05), and the score of the observation group was better than that of the control group (P<0.05). After treatment, the ratio of CD3+, CD4+ and CD4+/CD8+ in the two groups was significantly higher than that before treatment (P<0.05). The improvement of the indexes in the observation group was significantly better than that in the control group (P<0.05). The improvement of the indexes in the observation group was significantly better than that in the control group (P<0.05). After treatment, the levels of TNF-α, IL-17 and IL-22 in the two groups were significantly lower than those before treatment (P<0.05), and the improvement of the indexes in the observation group was significantly better than that in the control group (P<0.05). After treatment, the CT values of STAT3 and IL-17A mRNA in the peripheral blood of the observation group were significantly higher than those before treatment (P<0.05) and there was a negative correlation between the △CT value of STAT3 and IL-17A mRNA. Conclusion: The treatment of psoriasis vulgaris is better than that of western medicine alone, which can significantly reduce the area and severity of lesion, reduce the clinical symptoms and improve the quality of life of patients.
【Key words】 sagittal grass particles; Tripterygium wilfordii polyglycoside; psoriasis; efficacy
银屑病是一种临床常见的慢性炎症性皮肤病，主要由皮肤出现反复发作的红斑或银白色鳞屑为主要临床特征，在我国的发病率约为5%，呈不断增高的趋势，由于寻常型银屑病反复发作、迁延难愈，临床表现的严重脱屑、瘙痒难忍的皮损症状虽无法危及患者生命，但严重影响了患者的生活质量，使患者出现悲观、焦虑及抑郁的情绪[1]。因此，寻找治疗银屑病的有效药物具有重要临床意义。目前，银屑病的发病机制尚不十分清晰。多项研究表明[2-3]，其发病与遗传、免疫等因素有关，由T淋巴细胞介导的免疫炎性损伤可能在银屑病的发病中发挥重要作用。目前，临床综合疗法治疗银屑病的疗效不理想，且存在多种副作用，而传统中医学在治疗银屑病方面显示出了良好的前景[4]。本研究观察了垂盆草颗粒治疗寻常型银屑病患者的临床疗效，并分析其对调节性T 细胞及STAT3通路的调控作用，现报道如下。
1. 资料和方法
1.1 一般资料 选择2014年1月至2016年1月期间于我院就诊的寻常型银屑病患者56例，其中，男33例，女23例；年龄20～53岁，平均年龄（40.7±14.9）岁；病程2个月～19年，平均病程（6.8±9.5）岁；采用用银屑病面积和严重程度指数（PASI）进行病情评估，PASI评分1.7～50.3分，平均（19.7±8.3）分。纳入标准：①所有患者均符合ICD-10寻常型银屑病的诊断标准，且采用《中药新药临床研究指导原则》中银屑病以湿热蕴结证的诊断标准；② PASI评分均在10分以上；③年龄≥18岁；④进入本研究前均知情同意，签署知情同意书；⑤入组前1个月均未使用抗银屑病药物及糖皮质激素制剂进行治疗；⑥本研究已本医院医学伦理委员会批准开展。排除标准：①合并其他皮肤病及自身免疫性疾病患者；②合并心肝肾功能不全、神经系统疾病、内分泌系统及恶性肿瘤疾病者；③孕期、哺乳期妇女；④合并严重感染患者；④存在精神疾患无法配合治疗患者。采用随机数字表法将56例患者随机分为观察组和对照组，每组各28例。两组的性别、年龄、病程及PASI评分比较差异无统计学意义，具有可比性（P＞0.05）。
1.2 治疗方法 所有患者进入本研究后均开始给予给予雷公藤多苷片口服，每次20mg，每日3次，同时给予311 nm窄谱中波紫外线（NB-UVB）照射皮损部位，照射时首先测定最小红斑量，依据最小红斑量进行初始剂量的确定，范围在0.1～0.4 J/cm2，每3日照射1次，并根据红斑变化调整剂量，至少进行20次照射治疗。观察组在对照组治疗基础上联合垂盆草颗粒口服，每次1袋，每日3次。两组疗程均为2个月。2个月后评价疗效。
1.3 观察指标
1.3.1两组临床疗效比较 观察并记录患者治疗前后皮损面积及红斑、鳞屑的严重程度及浸润、瘙痒程度及的变化情况，参照文献标准进行PASI的评价，以红斑评分、 鳞屑评分及浸润评分之和与面积评分的乘积计算对PASI评分，同时，根据PASI评分进行临床疗效评估，疗效标准：若经治疗后PASI下降≥90%视为治愈；若经治疗后PASI下降≥60%视为显效；若经治疗后PASI下降≥25%视为好转；若经治疗后PASI＜25%视为无效。以治愈+显效例数计算临床总有效率。
1.3.2 两组患者生活质量评分比较 分别于治疗前后，由经过专业培训的调查研究人员进行问卷调查，问卷采用匿名填写并独立完成，所有患者均进行了有效的问卷调查。采用Herth希望量表（HHI）进行调查，主要了解患者对银屑病的希望水平和心理状态。 量表包括三个维度12个条目，即：对现实和未来的积极态度、采取积极的行动、与他人保持亲密的关系，采用likert 4级评分法进行评价，得分范围为12～48分，得分水平越高，表明希望水平越高。同时，采用皮肤病生活质量指数（DLQI）进行患者生活质量的评价，问卷主要包括10个项目，即：生理、心理、日常 活动、穿衣、社交娱乐、运动、工作学习、家庭、性生活及治疗，从症状和感受、日常活动、休闲、工作或学校的表现、个人关系和治疗6个不同的层面来评估患者与健康相关的生活质量。得分范围0分（完全不受影响）～30分（非常受影响），DLQI评分水平越低，表明患者生活质量越高。
1.3.3 两组患者治疗前后T淋巴细胞功能比较 分别于治疗前后抽取两组患者清晨空腹肘静脉血2 ml，肝素抗凝后，置于流式检测管中，每管加入相应抗体各5μl，同时，在空白对照管中加入5μl的流式抗体，4℃条件下孵育30min，加入相应标记物，流式细胞仪检测各组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+的比例及Th辅助细胞Th1和Th2细胞的比例。
1.3.3 两组患者炎性细胞因子水平比较 分别于治疗前后采集空腹肘静脉血2ml，3000r/min离心15min后，留取血清，采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测两组患者血清TNF-α、IL-17和IL-22的水平。
1.3.4 两组患者STAT3和IL-17A mRNA的表达水平比较 分别于治疗前后抽取外周肘静脉血2 mL，乙二胺四乙酸抗凝，-80℃保存备用。采用RNA提取试剂盒提取每份样本的全血总RNA，核酸蛋白测定仪检测A 260/A280比值以及总RNA浓度，若总RNA浓度在1.8～2.2则认为RNA纯度较好。之后按照反转录试剂盒说明书进行cDNA的反转录，反转录产物直接进行PCR扩增。选择β-actin为内参，STAT3：上游引物 5’-CACATGCCACTTTGGTGTTTCA-3’，下游引物5’-GGGCAATCTCCATTGGCTTC -3’。IL-17A：5’-CAGACTACCTCAACCGTTCCA-3’，5’-ACAATCGAGGCC ACGC AGGTGCAGC-3’。 目的基因引物和内参基因引物进行扩增同时在 60-95℃进行溶解曲线分析。采用2-ΔΔCt法进行数据的相对定量分析。最后对STAT3和IL-17A mRNA的表达与PASI进行相关性分析。
1.3.5 两组患者不良反应情况比较 观察并比较两组患者治疗过程中的不良反应发生情况。
1.4 统计学方法
采用SPSS 13.0统计软件包进行数据分析。计量资料采用均数±标准差(`x ±ｓ)表示，两组间均数比较采用两独立样本t检验，同组干预前后均数比较采用配对t检验。率的比较采用χ2检验。相关分析采用Spearman或Pearson相关分析。等级资料比较采用秩和检验。P＜0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 两组临床疗效比较
两组患者治疗前PASI评分比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组患者的PASI评分显著降低，与治疗前比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后显著低于对照组治疗后，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1.
经2个月的治疗后，观察组的的临床有效率为96.4%，显著高于对照组的78.6%，差异有统计学意义（χ2=4.082，P=0.043）。见表2.
表1 两组PASI评分比较 (`x ±ｓ，分)
| 组别 | PASI | |
| 对照组 | 治疗前 | 18.13±6.74 |
| 治疗后 | 9.68±2.61△ | |
| 观察组 | 治疗前 | 18.43±7.03 |
| 治疗后 | 4.66±2.12△▲ |
表2 两组临床疗效比较 例（%）
| 组别 | n | 治愈 | 显效 | 好转 | 无效 | 有效率 |
| 对照组 | 28 | 8 | 14 | 3 | 3 | 78.6% |
| 观察组 | 28 | 17 | 10 | 1 | 0 | 96.4% |
| χ2 | 4.082 | |||||
| P | 0.043 |
两组患者治疗前各项HHI及DLQI评分比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组的各项HHI评分显著高于，DLQI评分显著低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05），且观察组各项评分改善程度优于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3.
表3 两组患者HHI及DLQI评分比较(`x ±ｓ，分)
| 组别 | DLQI | HHI评分 | ||||
| 希望水平总分 | 对现实和未来的积极态度 | 采取积极地行为 | 与他人保持亲密的行为 | |||
| 对照组 | 治疗前 | 14.55±5.07 | 32.62±5.09 | 10.97±2.31 | 11.31±2.64 | 10.31±2.09 |
| 治疗后 | 10.14±2.93△ | 56.81±2.45△ | 19.14±2.76△ | 18.45±2.04△ | 19.22±2.16△ | |
| 观察组 | 治疗前 | 14.08±5.66 | 34.15±6.24 | 11.08±2.33 | 10.18±2.47 | 10.33±2.48 |
| 治疗后 | 5.24±3.06△▲ | 80.39±4.76△▲ | 27.48±3.11△▲ | 26.93±3.24△▲ | 25.89±3.43△▲ | |
2.3两组患者治疗前后T淋巴细胞功能比较
两组患者治疗前CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+的比例比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组患者CD3+、CD4+及CD4+/CD8+的比例显著高于治疗前， CD8+水平显著低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表4.
表3 两组患儿治疗前后淋巴细胞亚群比较（
±s，n=60）| 组别 | CD3+（个/μl） | CD4+（个/μl） | CD8+ （个/μl） | CD4+/CD8+ | |
| 对照组 | 治疗前 | 65.41±7.66 | 26.09±6.43 | 40.97±7.61 | 0.76±0.27 |
| 治疗后 | 80.87±15.12△ | 36.46±7.88△ | 30.99±5.11△ | 1.33±0.41△) | |
| 观察组 | 治疗前 | 66.09±8.76 | 26.55±6.59 | 41.37±8.06 | 0.78±0.18 |
| 治疗后 | 96.54±13.08△▲ | 55.08±11.33△▲ | 24.56±5.04△▲ | 1.97±0.45△▲ |
2.4 两组患者炎性细胞因子水平比较
两组患者治疗前TNF-α、IL-17及IL-22水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组患者TNF-α、IL-17及IL-22水平均显著低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表5.
表5 两组细胞因子的比较 (`x ±ｓ，pg/ml)
| 组别 | IL-17 | IL-22 | TNF-α | |
| 对照组 | 治疗前 | 87.26±15.98 | 108.76±21.22 | 29.07±10.14 |
| 治疗后 | 55.97±10.14△ | 57.72±11.09△ | 19.88±6.07△ | |
| 观察组 | 治疗前 | 86.64±14.90 | 109.87±20.99 | 29.56±10.44 |
| 治疗后 | 40.15±12.33△▲ | 38.92±14.15△▲ | 10.87±5.35△▲ |
2.5 STAT3及IL-17A mRNA的表达
治疗前，各组银屑病患者外周血中STAT3，IL-17A mRNA的△CT值显著小于正常组，说明STAT3及IL-17A mRNA的表达量均增高。经治疗后，观察组患者外周血中STAT3和IL-17A mRNA的△CT值显著升高，与治疗前相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。说明患者经治疗后STAT3及IL-17 mRNA的表达量明显降低。而对照组STAT3和IL-17A mRNA的△CT值较治疗前虽有所下降，但差异无统计学意义（P>0.05）。见表6.
经相关性分析显示，患者外周血中STAT3及IL-17A mRNA的△CT值与PASI评分之间呈负相关（r=0.516，P<0.05；r=0.613，P<0.05)，说明STAT3及IL-17A mRNA的表达与PASI呈正相关性。
表6 两组STAT3及IL-17A mRNA的表达水平比较 (`x ±ｓ)
Tab 6 The comparison of STAT3 and IL-17A mRNA expression between the two groups (`x ±ｓ)
| 组别 | STAT3 | IL-17AmRNA | |
| 正常组 | 2.95±1.22 | 2.68±1.56 | |
| 对照组 | 治疗前 | 0.51±0.37 | 0.79±0.45 |
| 治疗后 | 1.47±1.59△ | 1.33±1.22△ | |
| 观察组 | 治疗前 | 0.62±0.32 | 0.88±0.36 |
| 治疗后 | 3.16±1.66△▲ | 2.93±1.49△▲ |
2.6 两组患者不良反应比较 两组治疗过程中检测血常规、尿常规及肝肾功能、心电图均在正常范围内。治疗过程中，未见严重不良反应发生。
3. 讨论
目前，银屑病的发病机制尚不明确。大多数学者认为可能与遗传、感染、免疫、内分泌等多种因素密切相关。大部分学者认为其与T细胞介导的免疫反应密切相关，近年临床研究显示[5-6]，银屑病患者可溶性白细胞介素-2受体水平显著增高，同时伴有CD3+、CD4+细胞百分率及CD4+/CD8+的比例的降低，提示我们银屑病的患者存在细胞免疫功能下降的情况。同时，另有研究显示[7]，银屑病患者血清中TNF-α、IL-8及CD8+水平均显著增高，说明T淋巴细胞亚群参与了银屑病病情的发生发展，在其发病过程中存在着效应性T淋巴细胞的异常活化，而其相关炎性细胞因子TNF-α能够促进其炎性损伤过程，同时，还可诱导角质形成细胞分泌细胞间黏附分子1，促进淋巴细胞和中性粒细胞的粘附与聚集。另外，STAT3信号通路可能在银屑病的发病过程中发挥重要作用。研究表明[8]，银屑病患者皮损处可检测到STAT3的活化表达，若给予将K5.STAT3c转基因小鼠模型中的STAT3进行持续激活，小鼠可出现与的银屑病类似的皮损及组织病理学改变，提示STAT3通路激活后影响了患者的自身免疫稳态，导致银屑病的发生。STAT3可通过促进原始T细胞向CD4+效应T细胞（Th17 细胞）的转化，上调IL-17, IL-21, IL-22等因子的表达水平，导致炎症反应损伤的发生与发展。在多项临床研究中显示，银屑病患者皮损中IL-17和IL-22呈高表达状态。本研究结果显示，两组银屑病患者治疗前CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+的比例存在着异常表达，同时，STAT3及IL-17 mRNA的表达量均显著高于正常组，且STAT3及IL-17A mRNA的△CT值与PASI评分之间呈负相关，进一步证实了银屑病患者体内确实存在T淋巴细胞功能的紊乱，STAT3可以通过促进原始T细胞向Th17细胞分化，促进IL-17分泌而参与银屑病炎性损伤过程。
以往银屑病的治疗多采用雷公藤、甲氨喋呤等免疫抑制剂[9]，虽有一定的疗效，但副作用大，部分患者无法耐受且停药易复发，因此，寻找疗效确切、安全性好的治疗药物成为研究的热点。
寻常型银屑病可归属于传统中医学中的“白疕风”、“松皮癣”等病， 患者往往因素体热盛，后在饮食劳倦、情志内伤、外感邪气等因素作用下，风湿寒邪侵袭肺、胃，淤积于肌肤，导致气血运行失和，邪郁化火，热盛生风，肌肤失养脱屑，因此，本病在多以血热为主，可夹杂风、寒、湿邪致病，治法多以清热凉血解毒、润燥止痒之剂为主。垂盆草为景天科植物垂盆草的干燥全草，甘、淡，凉。有清热利湿；解毒消肿；止血养血之功效。临床被广泛应用于湿热黄疸；淋病；泻痢；肺痈；肠痈；疮疖肿毒；蛇虫咬伤；水火烫伤；咽喉肿痛；口腔溃疡及湿疹；带状疱疹。垂盆草颗粒是采用垂盆草全草，经现代工艺制成的颗粒制剂，主要大应用于急慢性肝炎湿热瘀结证[10]。但其在银屑病中的应用尚未见报道。
本研究结果显示，治疗后，两组患者的PASI评分显著降低，与治疗前比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。且观察组治疗后显著低于对照组治疗后（P＜0.05）。观察组的的临床有效率为96.4%，显著高于对照组的78.6%（χ2=4.082，P=0.043），治疗后，两组的各项HHI评分显著高于，DLQI评分显著低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05），且观察组各项评分改善程度优于对照组（P＜0.05）。提示联合使用垂盆草颗粒可提高湿热蕴结证银屑病的临床疗效。
另外，结果还显示，两治疗后，两组患者CD3+、CD4+及CD4+/CD8+的比例显著高于， CD8+水平显著低于治疗前（P＜0.05）。两组患者TNF-α、IL-17及IL-22水平均显著低于治疗前（P＜0.05）。且观察组治疗后各项指标改善程度显著优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。观察组患者外周血中STAT3和IL-17A mRNA的△CT值显著高于治疗前。说明经治疗后银屑病患者紊乱的T淋巴细胞功能得到了有效平衡，STAT3的活化得到了有效抑制，从而有效抑制了TNF-α、IL-17及IL-22等炎性因子的过度表达，减轻了皮损的炎性损伤，而观察组各项指标改善程度更加明显，说明联合垂盆草颗粒能更显著的抑制Th17细胞所导致的组织炎症损伤，改善机体免疫功能，疗效优于单纯西医治疗。
综上，垂盆草颗粒联合西医常规治疗寻常型银屑病患者疗效确切，疗效优于单纯西医治疗，可显著减小皮损面积及严重程度，减轻患者临床症状，提高患者的生活质量，其疗效机制可能与下调STAT3信号通路的表达，TNF-α、IL-17及IL-22等炎性因子的过度表达，改善了免疫功能，减轻了Th17细胞诱导的组织炎症损伤有关。
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