【摘要】目的  分析set与MACC1在不同子宫内膜组织中的表达情况，评价其在子宫内膜癌的发生、发展中的作用。方法  收集2013年1月～2015年3月于本院妇产科行手术治疗的41例子宫内膜癌患者的癌变内膜标本及患者的完整病例资料（包括年龄、临床分期、组织分级及有无淋巴结转移等），同时收集因功血诊刮的正常子宫内膜组织标本30例作为对照。采用免疫组织化学染色检测set和MACC1在不同子宫内膜组织中的表达情况、与子宫内膜癌临床病理参数间的相关性及两者间表达的一致性。结果  set、MACC1在正常子宫内膜组织的阳性表达率分别为3.3%（1/30）、10.0%(3/30)，在子宫内膜癌组的阳性表达率分别为68.3%(28/41)、61.0%(16/41)，组间比较结果显示两者在子宫内膜癌组织中的阳性表达率均高于正常子宫内膜组，差异具有显著性(P<0.05)。set、MACC1的表达与子宫内膜癌的临床分期、肌层浸润以及淋巴结转移情况显著相关(P<0.05)，临床分期晚、肌层浸润深、伴淋巴结转移的患者set与MACC1表达的阳性率较高，而与患者的年龄和肿瘤分化程度无显著相关性(P>0.05)。set与MACC1在子宫内膜癌组织中表达的Kappa一致性检验值为0.735(P<0.05)，表明set与MACC1在子宫内膜癌组织中的表达存在较好的一致性。结论  set与MACC1协同参与了子宫内膜癌的发生与发展，二者的异常高表达可作为判断子宫内膜癌转移与浸润的重要标志物，对疾病的临床诊断与治疗具有重要意义。
【关键词】set；MACC1；子宫内膜癌；
子宫内膜癌（endometrial cancer，EC）是指是来源于子宫内膜上皮组织的一组恶性肿瘤，是最常见的女性生殖系统肿瘤之一，在导致死亡的常见妇科恶性肿瘤仅次于卵巢癌和宫颈癌而位居第三位^[1]。据统计每年有约有接近20万的新发病例，且近年来呈上升趋势。结肠癌转移相关基因(metastasis-associated in colon cancer-1，MACC1)于2009年首次被报道，研究证明它参与了HGF/C-met的信号转导，而后者的过度激活与恶性肿瘤细胞的发生、转移和浸润密切相关。set基因（patient SE translocation, set）最初于1992年自1例急性未分化型白血病病例中分离并命名，同时在卵巢癌组织中也发现了set基因的高表达，目前认为set基因与多种肿瘤的发生和发展均具有相关性^[2]。本文通过检测set与MACC1基因在不同子宫内膜组织中的表达情况，以分析其在子宫内膜癌的发生、发展机制中的作用，现报道如下。
1资料与方法
1临床资料  收集2013年1月～2015年3月于本院妇产科行手术治疗的41例子宫内膜癌患者的癌变内膜标本及患者的完整病例资料（包括年龄、临床分期、组织分级及有无淋巴结转移等），同时收集因功血诊刮的正常子宫内膜组织标本30例作为对照。子宫内膜癌组患者年龄41~72岁，平均年龄（58.23±6.16）岁；病理类型均为腺癌；组织分级：高分化10例，中分化23例，低分化8例；临床分期（FIGO）：I期14例，II期6例，Ⅲ期17例，IV期4例；淋巴结转移16例，无淋巴结转移者25例。正常子宫内膜组患者年龄36~68岁，平均年龄（54.21±4.64）岁。本研究经我院伦理委员会通过，所有患者均签署知情同意书。
1.2主要试剂  set单克隆抗体（稀释浓度1：100，购自美国santa cruz公司），MACC1兔抗人多克隆抗体（稀释浓度1：200，购自北京中杉金桥公司），通用型SP-9000试剂盒、DAB试剂盒均购自北京中杉金桥公司。
1.3实验方法  
1.3.1免疫组织化学染色  采用SP法检测set、MACC1蛋白在子宫内膜组织中的表达。常规石蜡包埋组织，制成3~5μm的切片，以PBS（pH=7.4）代替一抗做阴性对照，已证实set蛋白、MACC1蛋白表达阳性的卵巢癌组织切片作为阳性对照。严格按照SP试剂盒说明书内容操作。
1.3.2结果判读  光镜下观测，细胞浆内或细胞膜出现浅黄色、黄色或棕黄色颗粒时为阳性反应，出现阳性反应的细胞为阳性细胞。依据染色深浅与视野内阳性细胞所占比例评定阳性反应的强度。在制好的免疫组化病理切片上随机选取10个高倍视野（×400），每个视野计数细胞100个。（1）按照阳性细胞所占的百分比例评分：未见阳性细胞为0分，<1/3时为1分，介于1/3~2/3之间为2分，>2/3为3分；（2）按照按照染色强度评分：无着色为0分，着浅黄色为1分，着黄色为2分，着棕黄色为3分。依据两项评分的乘积对检测结果做出定性判断：乘积≥3分时为阳性表达，<3分时为阴性表达。
1.4统计学分析  采用SPSS20.0统计软件对数据进行分析，set和MACC1在不同组织中的表达差异比较采用χ²检验，采用Kappa检验判断两者表达的一致性，检验水准а=0.05。
2结果
2.1 set、MACC1在不同子宫内膜组织中的表达情况  set、MACC1在正常子宫内膜组织的阳性表达率分别为3.3%（1/30）、10.0%(3/30)，在子宫内膜癌组的阳性表达率分别为68.3%(28/41)、61.0%(16/41)，组间比较结果显示两者在子宫内膜癌组织中的阳性表达率均高于正常子宫内膜组，差异具有显著性(P<0.05)。见表1。
表1  set与MACC1在不同子宫内膜组织中的表达情况

组别	例数	set		阳性率（%）	MACC1		阳性率（%）
		＋	–		＋	–
正常子宫内膜组	30	1	29	3.3	3	27	10.0
子宫内膜癌组	41	28	13	68.3	25	16	61.0
χ2				30.255			18.848
P				<0.001			<0.001

2.2 set与MACC1与子宫内膜癌临床病理参数间的关系  set、MACC1的表达与子宫内膜癌的临床分期、肌层浸润以及淋巴结转移情况显著相关(P<0.05)，临床分期晚、肌层浸润深、伴淋巴结转移的患者set与MACC1表达的阳性率较高，而与患者的年龄和肿瘤分化程度无显著相关性(P>0.05)。见表2。
表2  set、MACC1的表达与EC临床病理参数间的关系

病理参数		例数	set				MACC1
			＋	－	χ2	P	＋	－	χ2	P
年龄（岁）	<60	26	18	8	0.029	0.865	16	10	0.009	0.923
	≥60	15	10	5			9	6
分化程度	好	10	7	3	0.018	0.894	6	4	0.005	0.942
	适中-差	31	21	10			19	12
临床分期	Ⅰ-Ⅱ	19	10	9	4.011	0.045	9	11	4.188	0.041
	Ⅲ-Ⅳ	22	18	4			16	5
肌浸润	≤1/2	19	9	10	7.159	0.007	7	12	8.667	0.003
	>1/2	22	19	3			18	4
淋巴结 转移	有	16	7	9	7.299	0.007	6	10	6.077	0.014
	无	25	21	4			19	6

2.3 set与MACC1在子宫内膜癌组织中表达的一致性分析  set与MACC1在子宫内膜癌组织中表达的Kappa一致性检验值为0.735(P<0.05)，表明set与MACC1在子宫内膜癌组织中的表达具有较好的一致性。见表3。
表3  set与MACC1在子宫内膜癌组织中表达的一致性分析

指标		set
		＋	－
MACC1	＋	24	1
	－	4	12
Kappa值		0.735
P		<0.001

3讨论
子宫内膜癌为妇科三大恶性肿瘤之一，尤其在欧美地区，其发病率居妇科恶性肿瘤首位。而我国近年来随着人们生活方式的改变、临床治疗不规范所造成的激素滥用等原因，子宫内膜癌的发病率及死亡率亦呈逐年上升趋势。导致子宫内膜癌患者死亡的主要原因为肿瘤的转移与浸润，但目前上述病变的发生机制尚未完全明确。恶性肿瘤的发生与发展机制繁杂，不同肿瘤间存在差异性，但在其中细胞因子所发挥的重要作用却是相通的。
MACC1是新近发现的与结肠癌转移相关的基因，是HGF/C-met信号通路中的关键调节因子，可导致多种肿瘤的发生和转移。研究表明，MACC1在结肠癌、胃癌、肺癌、肝癌和卵巢癌组织中均被检测出异常高表达，因此被认为与肿瘤的发生发展密切相关，可作为判断肿瘤转移和预后的重要标志物^[3]。set基因最初分离于白血病细胞株，目前对于set基因的研究主要集中在白血病与卵巢癌。研究发现，set基因家族成员作为组蛋白甲基转移酶，控制着细胞的分裂、分化及发育，在调节细胞生长周期、基因转录以及肿瘤形成等方面均发挥着重要作用^[4]。由此我们推测set、MACC1也参与了子宫内膜癌的发生与发展过程。
本研究结果显示，set与MACC1在子宫内膜癌组织中的表达显著高于正常子宫内膜组；两者的高表达与子宫内膜癌的临床分期、肌层浸润和淋巴结转移情况显著相关，临床分期晚、肌层浸润深、伴淋巴结转移的患者set与MACC1表达的阳性率较高；两者在子宫内膜癌组织中的表达一致性较高。表明set与MACC1的高表达与子宫内膜癌的发生发展密切相关，且在作用过程中很可能具有协同性。
综上所述，通过检测set与MACC1在不同子宫内膜组织中的表达，分析其与子宫内膜癌临床病理参数间的关系以及两者在癌组织中表达的相关性，可初步明表明set与MACC1协同参与了子宫内膜癌的发生与发展，二者的异常高表达可作为判断子宫内膜癌转移与浸润的重要标志物，以为肿瘤的临床诊断与治疗提供参考依据。
 
 
参考文献
[1]董磊,蒋琴,张春乐,等. set基因在人结直肠腺癌中表达的研究[J]. 实用肿瘤杂志,2012,27(04):353-357.
[2]任淑敏,史惠蓉,张瑞涛,等. 结肠癌转移相关基因1、肝细胞生长因子和C-met在子宫内膜癌中的表达及其意义[J]. 中国实用妇科与产科杂志,2013,29(04):274-278.
[3]常秀娟,王春平,曲建慧,等. 结肠癌转移相关基因1 mRNA在乙型肝炎病毒相关肝细胞癌中的表达及其临床意义[J]. 中华肿瘤杂志,2013,35(10):748-752.
[4]杨君,夏永华,任艳芳,等. 结肠癌转移相关基因1在宫颈鳞癌中的表达及其与预后的关系[J]. 广东医学,2014,17(24):3814-3816.